Esterilitzacióés una pedra angular de la biologia cel·lular i dels experiments biomèdics. La majoria dels laboratoris biomèdics no podrien realitzar cap treball que inclogui el cultiu de cèl·lules vives sense instruments de laboratori esterilitzats. Tot i que molts laboratoris gaudeixen d'una relació informal amb l'esterilitat, és extremadament rar subestimar l'impacte de tenir instruments de laboratori estèrils. No obstant això, l'esterilització sovint queda relegada a una tasca important per al personal de laboratori de nivell inicial, com la neteja de vidre.
Un procés d'esterilització d'instruments feble pot provocar pèrdues econòmiques més grans que una manca total d'instal·lacions d'esterilització. Quan els laboratoris utilitzen equips mal esterilitzats, els experiments es poden contaminar fàcilment, provocant pèrdues per resultats inutilitzables o anormals. En alguns casos, l'equip contaminat pot contaminar altres instruments o maquinari, fent que el laboratori experimenti múltiples fallades experimentals que poden ser difícils d'aïllar i solucionar. Evitar aquests inconvenients d'esterilització inadequada requereix un enfocament rigorós i orientat als resultats per observar l'esterilitat, una pràctica que molts laboratoris podrien beneficiar-se d'adoptar.
Quins instruments cal esterilitzar?
L'esterilització és extremadament important per a qualsevol laboratori que realitzi treballs de cultiu cel·lular, tant que no és exagerat dir que s'han d'esterilitzar tots els instruments de laboratori implicats en el cultiu cel·lular. La majoria dels laboratoris tenen molt de maquinari i encara que facin cultiu cel·lular, no estan directament implicats en el treball del cultiu cel·lular. És important destacar que fins i tot els equips que no participen en el cultiu cel·lular es poden beneficiar de l'esterilització, suposant que el laboratori es pugui permetre el cost de l'esterilització.
Per exemple, els laboratoris que realitzen rutinàriament la seqüenciació genètica o la PCR poden trobar una proposta econòmica difícil esterilitzar les pipetes i els termocicladors necessaris per dur a terme el treball de biologia molecular. Com que aquests dispositius no estan implicats en el cultiu cel·lular, les conseqüències de no ser completament estèrils són mínimes, o això diu la raó. De manera crucial, aquesta raó és incorrecta.
Si bé és cert que la contaminació biològica d'aquests instruments no farà que els experiments de cultiu cel·lular molt cars morin després de l'exposició a microorganismes equivocats, fins i tot els experiments ex vivo poden tenir els seus resultats corromputs per una exposició incorrecta a materials biològics.
L'esterilització és una precaució important fins i tot per al maquinari de laboratori que mai ha estat exposat directament a cap material biològic. Per exemple, mitjançant la desinfecció de l'interior d'un gabinet de bioseguretat, un laboratori pot garantir que l'espai de treball dels seus experiments no es converteixi en una font de contaminació. De la mateixa manera, l'esterilització de vidre garanteix que es pot utilitzar al costat d'experiments sensibles sense por d'arruïnar els resultats.
Tanmateix, no tots els laboratoris tenen els fons per esterilitzar tot el que podria beneficiar-se. L'esterilització sovint és cara, de manera que la majoria dels laboratoris acaben prioritzant l'esterilització d'equips crítics alhora que permeten que altres instruments allunyats de l'àrea de cultiu cel·lular romanguin sense esterilitzar. Per tant, catalogar els recursos d'esterilització és un bon hàbit per desenvolupar els treballadors del laboratori, ja que el maquinari que no es pot utilitzar sense esterilització és de poca utilitat si la majoria dels altres equips del laboratori no s'esteriltzen en seqüència.
Què necessiten els laboratoris durant l'esterilització d'instruments
El procés d'esterilització té diverses etapes diferents, cadascuna de les quals requereix una quantitat diferent d'espai dins del laboratori. La complexitat espacial del procés d'esterilització depèn de si el laboratori realitza investigacions, treballs clínics o fabricació. La fabricació i el treball clínic tenen estàndards d'esterilitat més alts que el treball de recerca, de manera que la segregació i la complexitat dels espais d'esterilització és més evident. En resum, els tres espais necessaris per al procés d'esterilització són:
zona de descontaminació
zona d'embalatge
Zona d'esterilització
Cada espai té una finalitat diferent, corresponent a l'etapa del procés d'esterilització que s'encarrega de l'habitatge. La zona de descontaminació és on s'estableix la base de l'esterilitat, eliminant el màxim de contaminants possible mitjançant mètodes crus com la neteja amb aigua no estèril o productes químics de neteja.
Com que la descontaminació és sovint un assumpte desordenat, la majoria dels laboratoris prefereixen tenir un espai de descontaminació fora de l'espai de treball principal del laboratori. L'objectiu de la descontaminació és eliminar tota la contaminació visible de l'instrument o equip que s'està esterilitzant. Això podria incloure qualsevol cosa, des de grups de brutícia fins a productes químics de neteja aglomerats. És important que el procés de descontaminació no deixi enrere res que no estigués present abans de començar el procés. Per tant, la majoria dels processos de descontaminació acaben netejant l'equip amb aigua.
Després de la descontaminació, el laboratori ha d'embalar l'equip a descontaminar de manera que les superfícies funcionals del maquinari puguin estar exposades a l'esterilitzador però no a l'aire exterior o a qualsevol altre entorn que pugui provocar una nova contaminació.
Per exemple, per utilitzar vapor calent per esterilitzar l'interior d'un barril en un autoclau, haureu d'"empaquetar" el barril col·locant un tros de paper d'estany sense anar a la part superior de la boca del barril i enganxant-lo als costats. Així, quan s'autoclau quan el vapor calent de l'esterilitzador esterilitza la galleda, el vapor pot fluir sota la làmina, esterilitzant la superfície funcional de la galleda (l'interior que conté el líquid) i després surt. Com que la làmina està enganxada al barril, la superfície funcional del barril romandrà protegida dels elements i estèril fins i tot després de treure el barril de l'autoclau. Tanmateix, per als laboratoris que manipulen materials clínics o fabriquen productes farmacèutics, l'estàndard per als envasos estèrils va molt més enllà d'una simple solució de galleda d'alumini.
L'àrea d'esterilització és el cor del procés d'esterilització. Depenent de l'enfocament del laboratori, l'àrea d'esterilització pot utilitzar un dels diferents mètodes d'esterilització. Aquests mètodes poden incloure vapor calent i pressió, com en un autoclau de laboratori estàndard, o mètodes més exòtics, com la irradiació de raigs gamma. La majoria dels laboratoris s'adhereixen a qualsevol mètode d'esterilització disponible a les seves instal·lacions, el que significa utilitzar un autoclau la gran majoria del temps. Tanmateix, per als laboratoris implicats en la fabricació de productes farmacèutics o dispositius mèdics, la irradiació és més freqüent.
Validació del procés d'esterilització
Un cop completada una prova d'esterilització, la majoria dels laboratoris disposen d'un dels diversos mètodes per verificar que el seu equip està realment esterilitzat completament i no només parcialment. La manera més senzilla de verificar-ho és amb la cinta d'autoclau humil. Tot i que només és adequada per verificar l'esterilització en el context d'un autoclau, la cinta d'autoclau és efectiva perquè canvia quan s'exposa a condicions d'esterilització durant el temps necessari per garantir el color d'esterilització total. Per tant, molts laboratoris utilitzen àmpliament la cinta d'autoclau durant el procés d'esterilització.
La validació d'esterilització més complexa requereix experiments de cultiu cel·lular. En un experiment típic de verificació d'esterilització, una mostra d'un cultiu bacterian viable es fa passar per un procés d'esterilització utilitzat al laboratori i, a continuació, es passa el recipient del cultiu per obtenir cèl·lules viables. A continuació, es cultiven els hisops durant diversos dies i s'observen noves colònies cel·lulars. Si no creixen colònies, el procés d'esterilització té èxit.
Fer que les canonades d'esterilització aconsegueixin resultats
Abans que els laboratoris puguin esterilitzar amb èxit el maquinari de cultiu cel·lular associat, han de disposar dels subministraments adequats. Fer un seguiment del gran volum de reactius, netejadors i articles d'un sol ús necessaris per a un procés d'esterilització pot ser difícil, especialment per als laboratoris sense una llarga història de tècnica asèptica o de fabricació estèril. Per a tot, des de la cinta d'autoclau fins a les solucions de neteja de l'etapa de descontaminació, treballar amb un proveïdor experimentat és un factor important per donar suport a l'esterilització i l'experimentació amb èxit.
